布魯氏菌競爭ELISA診斷試劑盒

   布魯氏菌競爭ELISA診斷試劑盒 用于檢測牛、羊血清中的光滑型布魯氏菌抗體。

  通用名:布魯氏菌cELISA抗體檢測試劑盒

主要成分及含量

組分

數量

抗原包被板

1塊(或2塊或5塊或10塊)(96孔/塊)

單克隆抗體4C3

1管(120μl/管或240μl/管或600μl/管或1200μl/管)

陽性對照血清

1管(20μl/管或40μl/管或100μl/管或200μl/管)

陰性對照血清

1管(20μl/管或40μl/管或100μl/管或200μl/管)

羊抗鼠酶標抗體

1管(75μl/管或150μl/管或375μl/管或750μl/管)

羊抗鼠酶標抗體稀釋液

1瓶(15ml/瓶或30ml/瓶或75ml/瓶或150ml/瓶)

樣品稀釋液

1瓶(30ml/瓶或60ml/瓶或150ml/瓶或300ml/瓶)

20×洗滌液

1瓶(15ml/瓶或30ml/瓶或75ml/瓶或150ml/瓶)

底物顯色液

底物A:1瓶(6ml/瓶或12ml/瓶或30ml/瓶或60ml/瓶)

底物B:1瓶(6ml/瓶或12ml/瓶或30ml/瓶或60ml/瓶)

終止液

1瓶(12ml/瓶或24ml/瓶或60ml/瓶或120ml/瓶)

血清稀釋板

1塊或2塊或5塊或10塊

作用與用途】  用于檢測牛、羊血清中的光滑型布魯氏菌抗體。

用法與判定

1  用法

1.1  樣品處理  取動物全血,待血液凝固后,以4000r/min離心10分鐘,收集上清,血清應清亮,無溶血。

1.2  1×洗滌液的配制  使用前,將20×洗滌液恢復至室溫(20~25℃),并搖動,使結晶溶解(可在37℃水浴中加熱5~10分鐘),然后用去離子水作1:20稀釋,充分混勻。

1.3  待檢血清和對照血清的稀釋  在血清稀釋板中將待檢血清、陰性對照血清和陽性對照血清用樣品稀釋液作1:20稀釋。

1.4  單克隆抗體的稀釋   用樣品稀釋液按1:50稀釋,充分混勻。

1.5  操作步驟

1.5.1  加樣  取抗原包被板(根據樣品多少,可拆開分次使用),以1×洗滌液300μl/孔洗板1次,棄去洗滌液。將稀釋好的待檢血清、陽性對照血清和陰性對照血清分別加入到ELISA板中,50μl/孔,其中陽性對照血清和陰性對照血清各加2孔(孔1、孔2)。加樣結束后, 加入已稀釋好的單克隆抗體,每孔50μl,振蕩混勻5分鐘。37℃作用30分鐘后取出反應板,棄去反應液,每孔加入300μl 1×洗滌液,洗滌3次后甩干。

1.5.2  加酶標抗體  將羊抗鼠酶標抗體用羊抗鼠酶標抗體稀釋液作1:100稀釋后,每孔加入100μl,37℃作用30分鐘。按1.5.1中的方法洗滌3次,甩干。

1.5.3  顯色與終止  將底物溶液A和B按1:1(V/V)混合后,立即加入到ELISA反應板中,100μl/孔,室溫避光顯色15分鐘后,每孔加50µl終止液終止反應。

2  結果判定  反應終止后,15分鐘內用酶標儀測定OD450nm值。

2.1  計算公式

抑制率(PI)=(陰性對照OD450nm—檢測樣品OD450nm)/陰性對照OD450nm×100%。

2.2  試驗成立條件

2個陰性對照血清重復測定孔的平均OD450nm應≥2.0;2個陽性對照血清重復測定孔的平均OD450nm應<0.2,且PI平均值應≥90%時,試驗成立。

2.3  結果判定

當血清樣本的PI≥30%時,為布魯氏菌抗體陽性;

當血清樣本的PI<30%時,為布魯氏菌抗體陰性。

注意事項

(1) 本試劑盒僅供體外檢測使用。

(2) 嚴格按照說明書操作,不同批號組分不得混用。

(3) 所有試劑一律于2~8℃保存,使用前應在室溫平衡15~30分鐘后方可使用,抗原包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

(4) 血清稀釋板只能使用1次,未用完的血清稀釋板應將用過的孔充分洗滌拍干,并進行標記,避免下次檢測時發生混淆。

(5) 加樣時應盡量避免起泡及液體濺出,避免樣本間相互污染。

(6) 底物溶液應避光保存,避免與氧化劑接觸,盛裝底物溶液的容器應保持干凈。

(7) 終止液為1M的HCL溶液,具有腐蝕作用,避免接觸眼睛和皮膚。

貯藏與保存期】  2~8℃保存,有效期為12個月。

規格】  (1)96孔/盒 (2)192孔/盒 (3)480孔/盒 (4)960孔/盒

 僅供獸醫診斷使用

 

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